材料：質(zhì)粒DNA指數生長(cháng)的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱(chēng)取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過(guò)濾，儲存于4℃備用。1×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水，加入20ml1M的HEPES，調pH值到7.4，定容至1L，過(guò)濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃備用。方法：1．細胞分盤(pán)：通過(guò)胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養皿上（根據實(shí)驗需要選擇培養皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開(kāi)始轉染。轉染前換入2mL預熱的無(wú)血清培養基。更多關(guān)于PEI轉染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！哪個(gè)品牌的PEI轉染試劑質(zhì)量好？申請PEI轉染試劑試用裝轉染步驟
穩定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑(這個(gè)需要客戶(hù)自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會(huì )稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí)，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內容歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！?全球PEI轉染試劑試用裝幫助用戶(hù)更好地了解PEI轉染試劑的操作流程分子量為25000的線(xiàn)性PEI轉染試劑即Polysciences23966轉染效率比較高.
1.對于某些類(lèi)型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著(zhù)提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時(shí)細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無(wú)蛋白培養基則需測試與線(xiàn)性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來(lái)而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線(xiàn)性PEI轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題，歡迎咨詢(xún)上海曼博生物。?如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！
1.對于某些類(lèi)型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著(zhù)提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時(shí)細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無(wú)蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無(wú)蛋白培養基則需測試與線(xiàn)性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來(lái)而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線(xiàn)性PEI轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。?如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！?哪個(gè)品牌的PEI轉染試劑性?xún)r(jià)比較高？
PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學(xué)家選擇PEIMAX，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來(lái)，經(jīng)過(guò)眾多業(yè)內人士評審的公開(kāi)研究和出版文獻表明，在HEK293、CHO和Sf9系統中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩定性高，可靠性強。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉染試劑，適用于基礎科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉染試劑是一種即用型線(xiàn)性聚乙烯亞胺轉染試劑（PEI）衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無(wú)菌試劑，采用0.1μmPES無(wú)菌過(guò)濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險。適用于工藝開(kāi)發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無(wú)縫過(guò)渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！轉染效率好的PEI轉染試劑是哪個(gè)品牌？天津高實(shí)用性PEI轉染試劑試用裝
MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉染試劑。申請PEI轉染試劑試用裝轉染步驟
接種細胞：轉染前，用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，總體積如表1所示，每個(gè)孔置入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到70~80%。準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線(xiàn)性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線(xiàn)性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí)，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。轉染細胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無(wú)血清條件下轉染時(shí)，去除生長(cháng)培養基，替換成無(wú)血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長(cháng)培養基。孵育細胞和分析結果：在CO2培養箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定檢測時(shí)間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內容歡迎咨詢(xún)上海曼博生物！近期還可申請PEI轉染試劑試用裝！申請PEI轉染試劑試用裝轉染步驟